生物制品是制藥工業(yè)的一部分，對(duì)生產(chǎn)廠房有很高的潔凈要求，尤其是活jun、活疫苗的生產(chǎn)中，經(jīng)常受到不同程度的污染，因此，不僅需要重視潔凈室的建立，更要重視質(zhì)量控制方法及標(biāo)準(zhǔn)。

朝鮮戰(zhàn)爭(zhēng)中，美國(guó)發(fā)現(xiàn)大量電子儀器失靈，后找到了主要原因，是灰塵在作怪，促成了潔 凈技術(shù)的起步。1961年，誕生了世界上早的潔凈室標(biāo)準(zhǔn)，1966年，頒布了修訂后209A， 時(shí)至1992年，建立了迄今被廣泛采用的209E。上為了加強(qiáng)藥品、生物制品質(zhì)量管理規(guī)范 (GMP)，把潔凈室定為的生產(chǎn)硬件之一。GMP對(duì)廠房、設(shè)備等，明確規(guī)定了相應(yīng)的潔凈要 求，并制訂了有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。

1　潔凈室的污染源

潔凈室污染源按性質(zhì)可分物理、化學(xué)、生物等。直徑在0.001-1000μm的固態(tài)、液態(tài)或二者的混合物質(zhì)，包括生物粒子和非生物粒子，我們稱為懸浮粒子。微生物一般以無(wú)生命的粒子作載體而懸浮，以氣溶膠形式存在于空氣中，1μm以下者永外懸浮，10μm以上者會(huì)逐漸沉下來(lái)而形成菌塵。潔凈室污染可分為外部污染和內(nèi)部污染。外部污染指大氣塵污染，可以通過(guò)光電法測(cè)得。內(nèi)部污染，是由人和有關(guān)的物品、設(shè)備 等引起的。人是潔凈室大的污染源，占90%左右。人和環(huán)境造成了潔凈室的污染，所以在潔凈室中，人的數(shù)量和活動(dòng)應(yīng)有特別嚴(yán)格的限制。　　

2　潔凈室質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

表1　世界主要國(guó)家潔凈室標(biāo)準(zhǔn)(潔凈度)

潔凈室是指空氣潔凈度達(dá)到規(guī)定要求的可供人類工作的場(chǎng)所 ，其功能是控制微粒的污染 。一般按用途可分為：1.工業(yè)潔凈室，以無(wú)生命的微粒為控制對(duì)象;2.生物潔凈室，主要控制微生物對(duì)工作對(duì)象的污染。

3　潔凈室質(zhì)控的檢測(cè)方法及討論[8]

3.1　塵埃粒子　由于空氣中存在大量塵埃粒子，而微生物大多依附于這些塵埃粒子隨空氣流動(dòng)造成污染。制 藥工業(yè)用多種方法獲得無(wú)菌狀態(tài)，過(guò)濾法以其捕集率高，又經(jīng)濟(jì)而被廣泛使用。其中，特別應(yīng)該提到的是采用了HEPA(High Eicienoy Particulate Air)過(guò)濾器，對(duì)0.3μm以上空氣粒子捕集率高達(dá)99.97%以上，除濾過(guò)病du外，空氣中所有微生物顆粒可被濾除。因此， 正常潔凈室是無(wú)菌的，但是，由于人、物、環(huán)境等污染因素，潔凈室往往受到不同程度 污染。因此，我們多采用激光塵埃粒子計(jì)數(shù)且進(jìn)行監(jiān)控。標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表2。

表2　外有關(guān)懸浮粒子的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)(塵粒數(shù)/m3)

3.2　空氣微生物　空氣中活微生物大多依附塵埃粒子而形成生物活性粒子。應(yīng)用細(xì)菌采樣器抽取一定量的空氣 使其滯留在培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)計(jì)數(shù)菌落數(shù)。20世紀(jì)30年代，英國(guó)研制porton液體采樣器，美 國(guó)研制了AGI液體采樣器。1941年，Bourdion使用裂縫式采樣器，成為空氣微生物采樣測(cè)定的開(kāi)端。1956年，報(bào)道了六級(jí)篩孔撞擊式采樣器，1958年A.A.Andersn對(duì)其加以改進(jìn)并 定型生產(chǎn)，稱為安德森(Anderson)空氣微生物采樣器（蘇州宏瑞FSC-A6)。它由頂罩、6節(jié)篩板、3個(gè)彈簧及抽氣 孔和動(dòng)力裝置構(gòu)成。由于它采集粒譜廣 、效率高、生物失活率低等原因而廣泛使用至今?？諝馕⑸锊蓸悠饕话惴譃槠叽箢悾阂后w式、固體式、沉降式、離心式、光散射式和大容量式。本文將對(duì)離心式空氣微生物采樣器(R CS)作詳細(xì)討論?？諝馕⑸餃y(cè)試標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表3。

表3　外有關(guān)空氣微生物的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)(CFU/m3)

3.3　表面微生物　為了檢測(cè)潔凈室中墻壁、地板、儀器表面、桌面、門把等帶菌情況，通常選用接觸壓印法(Cortact)和棉拭法(Swabbing)等方法。需要時(shí) ，還可與過(guò)濾裝置相結(jié)合來(lái)完成棉拭采樣。1941年，Walter和Hvcker報(bào)道了COntact瓊脂平板方法，以后，Angelotti和Fotert等作了進(jìn)一步的工作。帶菌狀況都有要求，歐共體GMP( 草案)規(guī)定，100級(jí)：平均菌落數(shù)不可過(guò)5 個(gè);1000級(jí)：25個(gè);100000級(jí)：50個(gè)。表面微生物的檢測(cè)，越來(lái)越受到人們的重視。

3.4　關(guān)于沉降平皿(Settle plate)　1881年Kock創(chuàng)立。依靠空氣中的粒子自然沉降于瓊脂平板上的這種采集方法，由于粒子沉降 的速率很慢，如需采集到有效數(shù)量的粒子，就需暴露很長(zhǎng)時(shí)間。但因空氣中的致bing菌數(shù)量是很少的，金黃色菌菌球jun在醫(yī)院病房空氣中平均每140升才有一個(gè)活菌粒子，為了彌補(bǔ)這個(gè)缺陷，曾采用直徑為14公分的大平皿，以增加瓊脂的暴lu面積。Harding和Williams還曾用 一種多層平板的方法來(lái)進(jìn)一步暴露面積，每層放一個(gè)14公分直徑的平板，但結(jié)果不堪滿意。

由于潔凈室已濾除了大部分大顆粒，一般用此法是無(wú)意義的。但是，人為、環(huán)境和潔凈裝置 故障等原因引起的較大顆粒污染以及沉降平板采樣潔的簡(jiǎn)便，可作為日常監(jiān)測(cè)潔凈室水平的 一種參考方法。

3.5　關(guān)于RCS[9]　離心式空氣采樣器被介紹作為一種在醫(yī)院使用的檢 測(cè)空氣微生物的儀器，由于它輕便，無(wú)噪音而廣泛使用，并擴(kuò)展到制藥工業(yè)等領(lǐng)域。RCS通 過(guò)離心收集顆粒，為制藥工業(yè)所接受，因?yàn)樗坪醴螰DA所描述的“Active”采樣儀器。Gre-schel等認(rèn)為它相當(dāng)有效，Macher等則持反對(duì)意見(jiàn)。多年來(lái)，許多者了帶菌顆粒的大小，結(jié)論是：5-15μm，中等粒是13μm，而4μm以下很少。這些結(jié)果是從醫(yī)院、手shu室、辦公室、實(shí)驗(yàn)室和制藥無(wú)菌室所獲得。他們認(rèn)為，如果顆粒大小是已知的，RCS可定 量測(cè)定細(xì)jun濃度，但是，目前這些顆粒大小是未知的，故不能把它視為定量采樣器，只能歸于沉降平皿一樣的類型。